骨髓原始间充质干细胞（BMCS）是骨髓基质干细胞，是在哺乳动物的骨髓基质中发现的一种具有分化形成骨、软骨、脂肪、神经及成肌细胞的多种分化潜能的细胞亚群。它们对骨髓中的造血干细胞（HSC）不仅有机械支持作用，还能分泌多种生长因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）来支持造血。
一直以来人们在尝试用不同的方法分离这群特殊的细胞，目前常用的分离方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法。全骨髓法是根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性，定期换液除去不贴壁细胞，从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法是根据骨髓中各细胞成分比重的不同，分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。这两种方法耗时较长，不确定因素较多。随着对MSC表面抗原认识的深入及技术条件的成熟，人们开始利用免疫方法如流式细胞仪法等对其进行分离纯化。本文介绍的就是使用空气激发型流式分选仪对MSC进行分选，得到了高纯度的MSC，同时保持高效率。
大鼠骨髓间充质干细胞图片
一、MSC抗体标记及设门方法
1.所用抗体：
CD45 FITC、CD90 PE-cy7/Percp-cy5.5、CD106 PE、CD73 ReadiLink 555/570和死活染料Viva Fix 498/521。
2.设门方法：
a、在去除粘连细胞的基础上选取CD45弱阳性的活细胞作为后续进一步分析的细胞群；
b、通过设定FL2通道的FMO对照，圈定CD90+/CD73+及CD90+/CD106+的两群细胞为prospective MSCs，CD90-/CD73-及CD90-/CD106-的两群细胞为non-MSCs。
二、分选结果查看
分选条件：
使用100um喷嘴，30psi压力，41kHz频率，纯度模式，1000-1500 events/s分选速度。分选纯度达到92%-99%。
理论分选效率由CytoCalc软件计算所得，实际分选效率非常接近理论值，完胜！
