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犬主要免疫细胞及亚群鉴定的10色流式panel

来源: | 作者:/ | 发布时间: 2026-05-07 | 39 次浏览 | 🔊 点击朗读正文 ❚❚ | 分享到:

作为人类的忠诚伴侣与得力工作伙伴,犬类的健康始终备受关注。然而,它们面临着癌症、炎症等多种疾病的威胁,且治疗选择远少于人类。深入解析犬类免疫系统,是疾病诊断、治疗方案制定与疗效评估的关键。流式细胞术免疫分型技术为此提供了精准的解决方案,而Bio-Rad全新推出的10色犬类免疫分型panel,更是将这项技术推向了新高度!


技术痛点突破,panel升级势在必行

在以往的兽医临床与科研中,犬类流式细胞术panel多局限于8色,这极大地限制了单次实验中可识别的免疫细胞亚群数量,难以获取全面、细致的免疫图谱,给疾病的精准诊断和病情监测带来挑战。


为解决这一痛点,Bio-Rad凭借丰富的荧光染料偶联抗体研发经验,突破传统荧光基团(PE、FITC)的限制,将 StarBright系列染料偶联抗体融入panel设计,成功打造出经验证的10色犬类免疫分型panel,实现了免疫细胞检测的全面升级。


核心优势解析,赋能犬类免疫研究

1.覆盖全面,精准识别六大免疫细胞类型

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该panel可高效识别犬类T细胞亚群(CD4+辅助T细胞、CD8+细胞毒性T细胞)、B细胞、自然杀伤(NK)细胞、单核细胞和粒细胞,同时清晰呈现各细胞的标志物表达谱:

  • 细胞毒性T细胞(MHCII+CD5+CD3+CD8+)

  • T辅助细胞(MHCII+CD5+CD3+CD4+)

  • B细胞(CD5–CD21+)

  • NK细胞(CD94+)

  • 单核细胞(MHCII+CD14+)

  • 粒细胞(CD18+)


更值得一提的是,panel中包含的CD18(β2整合素)标志物,可特异性检测犬类白细胞粘附缺陷症(CLAD)——CD18表达缺失是该疾病的典型特征,为相关疾病的诊断提供了关键工具。


2. 设计科学,信号纯净分辨率高

Panel设计严格遵循多色流式最佳实践,借助Bio-Rad Multicolor Panel Builder和Fluorescence Spectraviewer工具,将荧光基团合理分配至5激光ZE5细胞分析仪的各个检测器,最大程度降低溢漏(spillover)和扩散(spread)效应。


即便panel中StarBright Violet 670(SBV670)与StarBright Blue 675(SBB675)染料间存在轻微扩散(数值仅2.9),也通过将其分别标记CD4+T辅助细胞和NK细胞(互斥细胞群),确保细胞群体的清晰区分,实现阳性与阴性信号的精准分离。


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3. 操作简便,适配现有实验流程

  • 无需特殊染色缓冲液:仅需使用含1%牛血清白蛋白(BSA)的磷酸盐缓冲液(PBS)即可完成染色,降低实验成本的同时,完美适配实验室现有workflows。

  • 单步染色流程:采用直接偶联抗体,无需二抗孵育,减少实验步骤与时间,同时避免交叉反应风险,结果更可靠。

  • 样本处理便捷:肝素抗凝新鲜血液4℃保存即可,实验中加入DAPI活死细胞染料,可有效排除死细胞非特异性结合导致的假阳性信号。


4. 高效整合,替代多重小panel

StarBright染料的融入,使得该10色panel能够替代以往多个小panel的检测功能。例如,无需再为初始淋巴细胞panel数据不足而进行额外实验,单次检测即可获取全面的免疫信息,极大提升了实验效率,助力快速诊断与疾病监测。


实验流程与数据支撑

样本处理与染色

1.犬类外周血经红细胞裂解缓冲液处理,去除红细胞;
2.白细胞用10%犬血清封闭5分钟(室温);
3.加入panel特异性荧光偶联单克隆抗体,室温孵育1小时;
4.用PBS/BSA洗涤3次,重悬后加入DAPI活死细胞染料,孵育5分钟后上样检测。


仪器与数据分析

样本在5激光ZE5细胞分析仪(带UV选项A)上采集,单次多色panel采集150,000个细胞,单染对照采集30,000个微球或细胞。采用FCS Express 7软件进行数据分析,通过基础门控策略先排除死细胞和双联体细胞,再基于前向散射(FSC)和侧向散射(SSC)识别单核细胞和粒细胞,后续通过特异性标志物进一步圈选目标细胞群。


关键数据展示

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适用场景广泛,助力兽医科研与临床

该10色犬类免疫分型panel适用于多种场景:

  • 犬类白血病等血液系统疾病的诊断与免疫分型;

  • 炎症性疾病的免疫状态评估;

  • 犬类作为人类疾病模型的相关免疫研究;

  • 疾病治疗效果监测与预后判断;

  • 犬类白细胞粘附缺陷症(CLAD)的特异性检测。


Bio-Rad全新10色犬类免疫分型panel,以StarBright染料偶联抗体为核心,凭借全面的细胞覆盖、精准的信号识别、简便的操作流程和高效的检测能力,为犬类免疫研究与临床诊断提供了强有力的工具。无论是推进兽医医学发展,还是守护犬类健康,这款panel都将发挥重要作用!


数据来源:

bio-rad-antibodies.com/static/2025/10-color-canine-panel-tech-note/bulletin-3871-10-color-canine-panel-tech-note.pdf


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* Bio-Rad,StarBright为Bio-Rad Laboratories, Inc.在特定区域的商标。本文所使用的所有商标均归其各自所有者所有。© 2026 Bio-Rad Laboratories, Inc.

* 本产品仅用于科研用途,不用于临床诊断。