Bio-Rad 最新的PrecisionAb系列磷酸化特异抗体,经过严谨的western blot验证,严格比较磷酸化刺激和未刺激的细胞裂解物确认抗体特异性,并进一步利用磷酸化酶进行去磷酸化处理对抗体进行反复验证 (Figure 1)。
![](https://pmteec9dc-pic14.websiteonline.cn/upload/20191224030644239.jpg)
Figure 1. Western blot 分析不同处理细胞裂解物。A:Mouse Anti-EGF Receptor Antibody (VMA00061) ; B: Mouse Anti-EGF Receptor (pTyr1173) Antibody (VMA00752)。二抗为HRP 标记的Goat Anti-Mouse IgG (1/10,000, STAR207P)。所有结果使用ChemiDoc MP 成像系统获得。
对以上处理得到的细胞裂解物进行磷酸化水平定量,您可以看出并迅速判断抗体的特异性(Figure 2)。
![](https://pmteec9dc-pic14.websiteonline.cn/upload/20191224030708378.jpg)
Figure. 2. 使用ChemiDoc MP TPN技术用总蛋白对磷酸化水平进行归一化处理,归一化的EGF R (pTyr1173) 表达情况如图。