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一款高性价比hiPSC/hESC培养基—中盛溯源ncTarget培养基

来源: | 作者:/ | 发布时间: 2023-09-05 | 1099 次浏览 | 分享到:

Nuwacell® ncTarget 是无血清、无需滋养层细胞的临床级/药品级培养基,可用于人胚胎细胞(hESC)和人诱导多能干细胞(hiPSC)的体外培养,能够长期维持hPSC的三层分化潜能和自我更新能力ncTarget可与本公司Vitronectin和Laminin511包被蛋白配合使用(临床级/药品级培养),或与基质胶配合使用(科研级培养)


产品优势


(1)无血清、无需滋养层细胞;可收集无外源干扰的纯净外泌体;

(2)可应用于iPSC工业化2D和3D大规模培养和扩增;

(3)自主化、国产化的原研体系;供货稳定,高性价比;

(4)支持临床级/药品级细胞培养,培养的iPSC细胞通过了中国食品药品检定研究院质量复核;iPSC来源功能药物通过了IND默示许可。


产品信息


*将基础液和添加物混匀配置成完全培养基,可在2℃~8℃中存储,2周内用完


ncTarget hPSC 完全培养基配置



1. 在 4℃解冻 ncTarget Supplement A/B,不要在 37℃条件下解冻。

2. 使用无菌移液管混匀下列成份配制成完全培养基。完全培养基可置于 4℃储存,2 周内使用。


ncTarget 人多能干细胞培养基-配置说明*


*可根据实际用量将 ncTarget Supplement A/B 分装后冷冻保存。具体配置比例可参考此表的配置说明。ncTarget Supplement A/B 冻融总次数不能超过 2 次。


细胞形态及功能鉴定



A、B、C:连续培养的hiPSC细胞株细胞形态图示。标尺:200μm。

D:细胞表面标志物检测:SSEA4+,Tra-1-81+。E:细胞多能基因检测:OCT4+,NANOG+。

F:连续培养的hiPSC(P30)细胞核型检测:46,XY。


Q&A

问:

 

问:hiPSC培养出现分化


答:

1)确保ncTarget完全培养基储存于4℃,并在2周内用完,每次只预温当次实验所需的培养基,减少ncTarget完全培养基的温度变化,避免培养基中的因子效价下降。

2)如hPSC克隆整体形态良好,零星分化细胞(<1%)出现于克隆周边,可以通过EDTA传代去除。

3)确保传代hPSC的细胞团大小均匀,约20个细胞左右的团块为佳;若细胞团较大,可用5mL移液管轻柔吹打不超过3次,力度要轻且均匀,否则细胞受压过大易产生破损、分化。

4)每次观察时避免将细胞从培养箱中取出超过15 min。

5)若hPSC克隆表现为内部松散,边缘不平滑,分化比例超过20%,则建议废弃。


问:换液后细胞漂起?


答:

1)接种后18-24小时后进行第一次换液,确保细胞已贴壁良好。

2)换液操作要轻柔,避免使细胞团脱离基质。

3)如接种细胞密度很低,e.g.细胞克隆实验,可连续2-3天不换液,保证培养基中含ROCKi。


文献引用


Embryonic Stem Cell Derived Small Extracellular Vesicles Modulate Regulatory T Cells to Protect against lschemic stroke  2021. Yuguo Xia,et al. ACS Nano(IF 18.027).

A splenic-targeted versatile antigen courier: iPSC wrapped in coalescent erythrocyte-liposome as tumor nanovaccine 2021.Yuewen Zhai,et al.Science Advances(IF 14.957).

miR143-3p-Mediated NRG-1-Dependent Mitochondrial Dysfunction Contributes to Olanzapine Resistance in Refractory Schizophrenia 2022. Jing Sun,et al.Biological Psychiatry(lF 12.81).